PEAKS denovo從頭測(cè)序功能介紹--一種不依賴于數(shù)據(jù)庫的肽段鑒定方法
瀏覽次數(shù):2327 發(fā)布日期:2023-4-10
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在串聯(lián)質(zhì)譜中,質(zhì)譜通過對(duì)肽鏈碎裂產(chǎn)生的碎片離子檢測(cè),進(jìn)而產(chǎn)生ms/ms譜。根據(jù)所采用的碎裂方法,可以產(chǎn)生不同的碎片離子類型。未知多肽的測(cè)序是在不需要序列數(shù)據(jù)庫的情況下,從質(zhì)譜中解析出氨基酸序列。這與另一種流行的肽段鑒定方法--“數(shù)據(jù)庫搜索”形成了鮮明對(duì)比,即在給定的數(shù)據(jù)庫中搜索與該譜圖正確匹配概率最大(或者錯(cuò)配概率最。┑碾摹.(dāng)沒有可參考的序列數(shù)據(jù)庫時(shí),多肽的從頭測(cè)序是唯一的選擇。
業(yè)界知名的PEAKS系列軟件的核心算法之一就有de novo,可以不依賴于數(shù)據(jù)庫高效地進(jìn)行全自動(dòng)的肽段序列預(yù)測(cè)。這使得PEAKS軟件成為鑒定未測(cè)序生物中新的肽和蛋白質(zhì)的首選方法。
PEAKS de novo功能特點(diǎn)
高通量、自動(dòng)化的從頭測(cè)序
精確的算法,提供de novo結(jié)果可信度打分,確保氨基酸水平的精確度
與database search整合,深度挖掘蛋白質(zhì)組的未知信息
支持CID、HCD、ETD/ECD 、EThcD、EAD等多種碎裂模式
精確度
PEAKS使用了全面綜合的打分體系,來對(duì)于de novo的肽段序列結(jié)果的準(zhǔn)確性進(jìn)行打分評(píng)估。PEAKS的獨(dú)特之處在于local confidence(LC score)評(píng)分--評(píng)估結(jié)果中肽段每個(gè)氨基酸分配的可能性。local confidence score將測(cè)序的準(zhǔn)確度聚焦到氨基酸水平。在圖中, TYEQLAEQNR 是通過了可靠性閾值的序列標(biāo)簽。
互補(bǔ)的碎片離子
碎片離子對(duì)的使用:de novo從頭測(cè)序使用由不同的碎裂方式(例如ETD/HCD)產(chǎn)生的成對(duì)的譜圖。每個(gè)互補(bǔ)的譜圖產(chǎn)生置信度de novo序列標(biāo)簽用來重構(gòu)一個(gè)肽序列,并對(duì)兩個(gè)譜圖進(jìn)行優(yōu)化。
不同譜圖進(jìn)行測(cè)序(優(yōu)化前)
互補(bǔ)的譜圖進(jìn)行測(cè)序(優(yōu)化后)
與Database Search整合
PEAKS的獨(dú)特之處在于能夠?qū)⒍嚯?em>de novo測(cè)序結(jié)果與數(shù)據(jù)庫搜索結(jié)果相結(jié)合。多肽de novo序列與蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫條目比對(duì),以提供關(guān)于PTM、突變、同源多肽和全新肽段的附加信息。
從多肽從頭測(cè)序到蛋白質(zhì)測(cè)序
蛋白質(zhì)的序列可以由多肽的
de novo測(cè)序結(jié)果中獲得。擁有直接的譜圖碎片離子證據(jù)的可靠的
de novo多肽序列標(biāo)簽,可以用來組裝為蛋白質(zhì)序列。PEAKS
de novo應(yīng)用到蛋白質(zhì)測(cè)序的最佳實(shí)例就是在抗體測(cè)序方面的軟件
PEAKS AB--該軟件可依據(jù)質(zhì)譜二級(jí)譜圖所提供的譜峰信息全自動(dòng)對(duì)抗體進(jìn)行蛋白水平
de novo從頭測(cè)序及序列拼接的工作,高效自動(dòng)化地代替人工拼接,從而獲得目標(biāo)抗體的全序列,為研發(fā)工作帶來更大的便利和更好的準(zhǔn)確性。
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