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全能核酸酶在病毒純化及生產中的應用

瀏覽次數:331 發(fā)布日期:2023-8-18  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
病毒疫苗的生產、細胞治療與基因治療等領域均可能會用到病毒,對其質量進行控制對于保障上述產品的安全性和有效性具有及其重要意義。其中HCD殘留可能會傳遞腫瘤或病毒相關基因,造成潛在的危險性,因此,去除宿主核酸或在最大程度上降低其殘留刻不容緩。


接下來小編就帶您
一起了解
在病毒純化過程中

如何正確使用全能核酸酶


常見的病毒純化流程

全能核酸酶應用條件

全能核酸酶的酶活會受到多種因素的影響(例如溫度、pH、離子強度等),故用量范圍也會從0.1 U/mL-250 U/mL不等。因此,不同的操作環(huán)境下酶的最佳濃度不同,需要通過實驗設置梯度進行最佳條件的摸索。

以下是文獻中具體的應用實例:


1. 樣品:狂犬病毒濃縮液

處理條件:核酸酶濃度50~90U/ml ,

37 ℃處理 2 h,轉入18 ~ 26 ℃處理 6h

2. 樣品:狂犬病病毒濃縮液

處理條件:25、50和100 U/ml,37℃


3. 樣品:流感病毒濃縮液

處理條件:10 U/mL,37℃


參考文獻

[1] 崔燕平. 非限制性核酸內切酶對狂犬病疫苗中Vero細胞DNA的去除作用[J]. 中國生物制品學雜志, v.27(04):444-447.

[2] 劉杰,劉輝,楊會強,康莊,孫艷,毛川成,何敏,李玉華.多種方法結合去除凍干人用狂犬病疫苗中Vero細胞殘留DNA[J].中國生物制品學雜志,2013,26(12):1827-1830.

[3] 阮朝列,施錦麗,李衛(wèi)東等.Benzonase核酸酶在Vero細胞流感病毒滅活疫苗中的應用研究[J].病毒學報,2023,39(04):980-990.

來源:上,|馳儀器有限公司
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