細胞碎片可能的原因和恢復方法及其與細胞污染的區(qū)別

Hey小伙伴們，今天我們來聊聊細胞碎片的那些事兒，快拿起小本本記好啦！

細胞碎片長什么樣，如何和污染區(qū)分？

細胞經(jīng)過運輸后，部分細胞皺縮、脫落比較明顯，脫落的細胞部分殘骸就會保留在原地，高倍鏡下觀察就比較臟，脫落的細胞同時會產(chǎn)生凋亡小體附著在貼壁細胞表面和液體里。高倍鏡下觀察細胞碎片、分泌物就尤其多，形成大小不一的黑色圓點，或不規(guī)則形狀，在原地震動，布朗運動等情況。

那這個時候有人就來質(zhì)疑，細胞是不是污染了，細胞狀態(tài)差需要怎么調(diào)整呢？

污染

1、當你懷疑你的細胞到貨就污染時，你可以使用一個6孔板取2ml或小培養(yǎng)瓶T12.5添加4ml,T25瓶添加5ml,取細胞培養(yǎng)液進行空培養(yǎng)2-4天。

2、當培養(yǎng)基變渾濁、快速游動，快速轉(zhuǎn)圈或相對液體靜止、圓球狀或桿狀，形態(tài)非常規(guī)則、黑色點狀分布均勻等情況時，是污染。

碎片

3、同理如果黑點不增值，大小不均勻，高倍鏡下原地震動，那不用擔心，這是細胞碎片，只要培養(yǎng)基營養(yǎng)足夠，傳代1-2次后碎片會減少很多。

碎片是怎么產(chǎn)生的呢？

1.細胞懸浮液處理不當：就像我們搖晃飲料一樣，如果太用力，泡沫和沉淀物就會增多。細胞懸浮液也是，如果抖動或振蕩得太猛，細胞就會“暈頭轉(zhuǎn)向”，一不小心就變成碎片了。

2.細胞密度過高：想象一下，如果一個房間里擠滿了人，大家擠來擠去，摩擦自然就多了。細胞也是這樣，密度太高，細胞間的“摩擦力”就會增加，碎片也就隨之而來。

3.細胞本身就是碎片化的：有時候，細胞就像我們一樣，如果生病了或者沒活力了，就會慢慢衰弱，最終“離世”。細胞也是一樣，一旦失去活力，就會自然死亡，變成碎片。

4.受到運輸環(huán)境影響：細胞在運輸過程中，就像是我們坐長途飛機，難免會感到不適。細胞也會發(fā)生應激反應，分泌活動增加，導致分泌蛋白增多。同時，路途中凋亡的細胞碎裂后，也會增加細胞碎片。

以上就是細胞碎片可能的幾種原因啦，希望對你們有所幫助！在實驗中遇到細胞碎片問題時，記得檢查一下這些可能的原因哦～

如果你們有其他問題或者經(jīng)驗分享，也歡迎在評論區(qū)交流哦！

遇到細胞碎片不要驚慌！教你讓細胞慢慢恢復

1.PBS洗滌法：就像給細胞洗澡一樣，用PBS輕輕拍打培養(yǎng)瓶，讓那些貼壁不牢的碎片和顆粒脫落，然后把它們沖走。這個方法簡單又溫和，不會傷害到我們的細胞寶寶哦！

2.消化+離心大法：消化細胞后，用低速離心，比如900-1000rpm，3分鐘，然后棄去上清液，把細胞碎片甩掉。但要注意，這個方法可能會讓一些細胞寶寶受傷，所以要溫柔一點，別太粗暴哦！

3.控制胰酶消化時間：在處理細胞碎片時，記得控制胰酶消化時間，別吹打得太猛，這樣可以減少細胞碎片的產(chǎn)生，保護細胞寶寶。

4.避免過度攪拌：在培養(yǎng)過程中，要避免攪拌過度，特別是在離心和重懸時，這樣可以減少細胞碎片的產(chǎn)生，讓細胞寶寶更安全。

5.控制細胞密度和培養(yǎng)時間：高密度和長時間的培養(yǎng)可能會導致細胞自發(fā)破裂，所以適當控制細胞密度和培養(yǎng)時間，可以讓細胞寶寶更健康。

6.選擇合適的培養(yǎng)基和條件：不同的細胞寶寶需要不同的家，所以要選擇合適的培養(yǎng)基和條件，這樣可以減少細胞碎片的產(chǎn)生，讓細胞寶寶更舒適。