TACS® 2 TdT原位凋亡檢測(TUNEL法)試劑盒說明書

DNA斷裂是細胞凋亡的重要特征，在凋亡初期，DNA可斷裂形成200-250kb或30-35kb 的大片段；晚期則可進一步在核小體間斷裂，形成180-200bp的DNA斷裂碎片。TUNEL(TdT mediated dUTP Nick End Labeling，末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP 缺口末端標記法)可以檢測到任何形式的DNA斷裂，業(yè)已成為細胞凋亡檢測的常用方法，其結(jié)果可用光學(xué)顯微鏡或流式細胞儀進行分析。可用TACS® 2 TdT原位凋亡檢測(TUNEL法)試劑盒進行試驗。

TUNEL法原位檢測即是利用外源性的TdT酶(Terminal deoxynucleotidy transferase，末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶)，將標記的底物dUTP或BrdU(無或有熒光標記)加到DNA的斷點上，從而實現(xiàn)對DNA斷點的標記， 然后用酶法(如HRP-抗dUTP抗體)或熒光法(如BrdU-FITC)來檢測結(jié)果，以顯示凋亡時DNA斷裂的程度。艾美捷向您推薦享譽全球的 Trevigen TUNEL全系列解決方案。這些方案包括，基于BrdU滲入并檢測原理的TACS® XL原位凋亡檢測方案，基于TdT酶將生物素Biotin標記dUTP滲入并標記的TACS® 2 TdT TUNEL檢測方案，專門針對不同組織(如神經(jīng)/腫瘤/心肌/血管/皮膚等)樣本的TUNEL檢測方案，另外還有分別適用于微孔板檢測和流式細胞術(shù)檢測的 TUNEL方案等。

其中Trevigen獨特的TACS® 2 TdT試劑盒利用Trevigen獨有的陽離子優(yōu)化體系在特定組織內(nèi)增強標記信號，并結(jié)合獨特的無毒標記液提高操作的安全性。試劑盒內(nèi)選用高度純化的TdT酶配以生物素化核苷酸進行原位標記，后繼采用鏈親和素-辣根過氧化物酶體系進行檢測，最終使用DAB或TACS藍色標記進行生物素標記檢測。另外還有熒光檢測方案，即采用熒光素偶聯(lián)的鏈親和素檢測，并使用表面熒光顯微鏡直接觀察結(jié)果。這些完全試劑盒提供標記所需全部試劑，包括兩種透化劑、標記和檢測試劑、終止液、復(fù)染以及制備陽性對照的TACS-核酸酶試劑。其中TACS 2 TdT原位凋亡核心試劑盒僅提供了TUNEL所需的基本試劑，包括TdT標記、檢測、終止溶液以及TdT酶和相關(guān)緩沖液；TACS 2 TdT原位凋亡DAB檢測試劑盒則在核心試劑盒的基礎(chǔ)上還提供了兩種透化劑、復(fù)染試劑、制備陽性參照的TACS-核酸酶，以及DAB底物；TACS 2 TdT藍色標記原位凋亡檢測試劑盒則只是采用獨有的顯示藍色標記，最終顯色為藍色；而TACS 2 TdT熒光標記原位凋亡檢測試劑盒則最終為綠色熒光顯色并觀察。TACS® 2 TdT Replenisher Kit補充試劑盒僅提供了核心試劑盒中的TdT檢測溶液、TdT酶和相關(guān)緩沖液等。

TACS® 2 TdT系列試劑盒具有如下特點：1、基于TdT的原位標記；2、高信噪比，信號強，背景低；3、提供DAB，TACS藍色標記或熒光檢測等多種選擇的完全試劑盒；4、包含獨一無二的Cytonin通透化試劑；5、包含TACS-核酶陽性對照試劑。

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