無(wú)需染色的細(xì)胞活力檢測(cè)介紹
瀏覽次數(shù):2152 發(fā)布日期:2015-7-3
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細(xì)胞活力是總細(xì)胞中活細(xì)胞所占的百分比,其中臺(tái)盼藍(lán)染色方法最常見(jiàn)。臺(tái)盼藍(lán)可穿透變性的細(xì)胞膜,與解體的DNA結(jié)合,使其著色,而活細(xì)胞能阻止染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),故可以鑒別死細(xì)胞與活細(xì)胞。
激光全息細(xì)胞成像及分析系統(tǒng)可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞死亡過(guò)程,以及通過(guò)圖像進(jìn)行記錄。 全息技術(shù)無(wú)需熒光和染料標(biāo)記就可以得到細(xì)胞形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)。Khmaladze A. et al(2012) 和Pavillion N. et al(2012)使用DHM研究細(xì)胞死亡過(guò)程,觀察到死亡過(guò)程中細(xì)胞體積顯著減小。Kuhn et al(2013)使用DHM研究活/死細(xì)胞特點(diǎn)時(shí)得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果和和基于熒光標(biāo)記方法結(jié)果相一致。他們使用PI和Hoechst標(biāo)記細(xì)胞。
鼠成纖維細(xì)胞L929接種在μ-slide 上,腫瘤藥物依托泊苷etoposide(100μM)處理細(xì)胞,使用激光全息細(xì)胞分析系統(tǒng)(M3)分析細(xì)胞的死亡,并與臺(tái)盼藍(lán)染色法進(jìn)行比較。圖1中左圖為臺(tái)盼藍(lán)染色結(jié)果,右圖為全息結(jié)果,細(xì)胞越白,細(xì)胞越厚。死細(xì)胞是圓的,薄的。兩種方法得到的結(jié)果是一樣的。
使用激光全息細(xì)胞成像用來(lái)分析細(xì)胞活力,無(wú)需不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行細(xì)胞臺(tái)盼藍(lán)染色,就可以實(shí)時(shí)得到細(xì)胞活力數(shù)據(jù)。