naica®微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)在量化胰島素編碼DNA甲基化水平的應(yīng)用

導(dǎo)讀

在過去的幾十年中，糖尿病的發(fā)病率在全球范圍內(nèi)顯著增長。除了不健康的生活方式外，環(huán)境污染物被認(rèn)為是糖尿病發(fā)生的危險因素。多環(huán)芳烴 (PAH)是一類含有2-7個芳環(huán)的有機化合物，由自然和人類活動產(chǎn)生并廣泛存在的污染物。流行病學(xué)研究表明，PAHs水平與成人和兒童的肥胖和二型糖尿病相關(guān)。

廈門大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院細(xì)胞應(yīng)激生物學(xué)國家重點實驗室的研究人員在Ecotoxicology and Environmental Safety上發(fā)表了題為《Prenatal exposure to a mixture of PAHs causes the dysfunction of islet cells in adult male mice: Association with type 1 diabetes mellitus》的文章。文中應(yīng)用naica^®微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)對胰島素編碼基因DNA甲基化水平進行量化，揭示了產(chǎn)前暴露于多環(huán)芳烴混合物對成年雄性小鼠胰島細(xì)胞功能的不良影響。

應(yīng)用亮點：

▶  使用naica^®微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)對胰島素編碼基因啟動子甲基化水平進行量化。

▶ 在產(chǎn)前暴露于500µg/kg PAHs的小鼠中，胰島素編碼基因啟動子的甲基化水平顯著升高。

▶ 產(chǎn)前暴露于PAHs可能促進I型糖尿病的發(fā)病。

作者使用8種PAHs的混合物進行了實驗，以研究產(chǎn)前PAHs對成年期胰島細(xì)胞功能和質(zhì)量的影響，同時試圖闡明 I型糖尿病發(fā)病的環(huán)境原因。他們分離了成年雄性小鼠的胰島，對胰島素編碼基因的啟動子DNA甲基化水平進行分析。

研究成果：

▲圖1. 產(chǎn)前暴露于多環(huán)芳烴對成年雄性小鼠胰島素編碼基因甲基化水平的影響。(A) 數(shù)字PCR結(jié)果代表性一維圖。(B)胰島素編碼基因啟動子甲基化水平。(每個處理三只母鼠, 每只母鼠取一個雄性后代) 。

在本研究中，子宮內(nèi)暴露于500µg/kg PAHs的小鼠胰島中胰島素編碼基因啟動子中的DNA甲基化水平顯著增加，同時胰島素編碼基因轉(zhuǎn)錄顯著下調(diào)。

▲圖2. 不同PAHs濃度對胰島素編碼基因轉(zhuǎn)錄水平的影響

原文鏈接如下：https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0147651322005358

期刊介紹：

Ecotoxicology and Environmental Safety 1977創(chuàng)刊，隸屬于愛思唯爾出版集團。是一份多學(xué)科交叉期刊，主要研究環(huán)境污染對包括人類健康在內(nèi)的生物體的暴露和影響。最新影響因子為7.129。

naica^®六通道數(shù)字PCR系統(tǒng)

法國Stilla Technologies公司naica^®六通道數(shù)字PCR系統(tǒng)，源于Crystal微滴芯片式數(shù)字PCR技術(shù)，自動化微滴生成和擴增，每個樣本孔可實現(xiàn)6熒光通道的檢測，智能化識別微滴并進行質(zhì)控，3小時內(nèi)即可獲得至少6個靶標(biāo)基因的絕對拷貝數(shù)濃度。