InnoQuant熒光玻片掃描儀助力生物組織熒光切片掃描和分析

 

免疫熒光染色技術廣泛用于樣本中待測標志物的含量分析，待測標志物在細胞內或細胞外的分布以及不同標志物之間的相互作用，在細胞水平和組織水平進行實驗論證，有效銜接微觀分子水平到宏觀動物整體水平之間的研究工作。

 

在切片免疫熒光染色實驗中，掃描成像是其中關鍵一環(huán)，高清的圖像更利于后續(xù)的空間結構分析和精準的定量分析。因此，選擇合適的切片掃描設備尤為重要�，F(xiàn)有主要兩大類，一類是以共聚焦顯微鏡為代表的設備，其成像效果佳，可有效去除背景熒光，但是操作復雜，使用門檻高，沒有足夠的經(jīng)驗很難拍出高質量的圖片。另一類設備是玻片掃描儀，相對于共聚焦顯微鏡，操作簡單易上手，然而主流的熒光切片掃描儀多是寬場成像（非共聚焦成像），圖片的背景熒光強、圖片質量差，無法精準定位和定量。 

 

同時，這兩類設備存在一些共性問題：易脫焦-掃描儀不能判斷最佳的聚焦位置，尤其面對平整度較差的樣本時更突出（圖1）。此外還需要后期拼接——受限于工作機制，需要將整個樣本分割成小塊區(qū)域，逐個掃描之后再拼接完成，一定程度上導致圖像在接縫處失真。由于CCD是采用面成像的工作原理，成像區(qū)域的中央和四周光強不一致，反映在圖像上為中央明亮，周圍暗淡，仍需要后期進行陰影校正。（圖2）

圖1 （左）平整度較差的樣本，掃描完成的圖像四周出現(xiàn)明顯脫焦 （右）傳統(tǒng)掃描儀掃描后的圖片，需要后期拼接和陰影校正，影響圖片質量

 

在此背景下，法國Innopsys公司推出了InnoQuant熒光玻片掃描儀。這款設備利用激光共聚焦成像，逐點成像、整片一次掃描的技術，給免疫熒光染色技術帶來了新的革命。

 

InnoQuant內置三種對焦模式：定焦（Fixed focus）、Autofocus by surface和Autofocus by content。除了定焦模式采用固定不變的焦距之外，另外兩種模式可以根據(jù)樣本的內部結構或者玻片自身的平整度，識別出最佳的聚焦平面，避免脫焦。

不用于其他設備的多個分割區(qū)域掃描再拼接的方法，InnoQuant采用逐點掃描，一次成像的方式，將整個樣本最真實地保存下來，無需任何后續(xù)拼接和加工。此外，逐點掃描保證采集樣本信息時所有的激發(fā)光都保持同一水平，不存在因光強不一致導致的結果失真，無需陰影校正，保證后續(xù)分析結果準確。(圖2)

圖2  （A）傳統(tǒng)掃片原理（左）與InnoQuant掃片原理（右） （B）百合花切片掃描結果比較：傳統(tǒng)掃片裝置（左）與InnoQuant掃描結果（右）

InnoQuant內置4組獨立激光光源和PMT檢測器，每個PMT最多可安裝7個濾光片，不但兼容常用熒光染料，還可根據(jù)用戶需求定制。此外，4個檢測通道可同時工作，一張4熒光染料標記的標準玻片（26mm*76mm），在17min內完成掃描，而共聚焦顯微鏡則需要數(shù)個小時，InnoQuant掃描速度更快。

 

 

作為一款最新推出產(chǎn)品，InnoQuant憑借其獨特的工作原理，強有力的硬件配置，已成為滿足廣大科研工作者免疫熒光染色的強有力的助手。

 

Innopsys 成立于1999年�？偛课挥诜▏�，一直致力于生物醫(yī)學領域相關儀器和軟件的自主研發(fā)和生產(chǎn)。InnoQuant組織切片/生物芯片掃描儀，采用先進的共聚焦PMT檢測器和多激光掃描光路，可以同時進行多通道熒光檢測。不僅掃描結果清晰，而且無需后續(xù)拼接和陰影校正處理，在組織切片和生物芯片掃描領域都有廣泛應用。

 

環(huán)亞生物，生命科學產(chǎn)品全國性代理商，具備完善的公司運營、產(chǎn)品管理、營銷、售前技術支持和售后維修體系。環(huán)亞生物作為InnoQuant大中華區(qū)代理商，負責InnoQuant產(chǎn)品大中華區(qū)的營銷和售后支持。

 

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