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顯微成像與循環(huán)腫瘤細胞(CTCs)檢測

瀏覽次數(shù):236 發(fā)布日期:2025-1-26  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負

01循環(huán)腫瘤細胞(CTCs)介紹

循環(huán)腫瘤細胞(CTCs)是指存在于外周血中的各類腫瘤細胞的統(tǒng)稱。循環(huán)腫瘤細胞以不同形態(tài)存在于外周血中,既有游離的單個循環(huán)腫瘤細胞,也有聚集成團的細胞團(CTM,CirculatingTumor Microemboli),它們是惡性腫痛患者出現(xiàn)術(shù)后復(fù)發(fā)和遠處轉(zhuǎn)移的重要原因,也是導致腫瘤患者死亡的重要因素。

腫瘤細胞從腫瘤組織中脫落,在進入外周血循環(huán)的過程中發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)變(EpithelialMesenchymal Transition,EMT),并克服自身及血液循環(huán)中各種因素的殺傷作用,到最后定植形成新的轉(zhuǎn)移灶等多個步驟,使得循環(huán)腫瘤細胞(CTC)可順利侵襲轉(zhuǎn)移從而促進相關(guān)疾病的進展。

02循環(huán)腫瘤細胞檢測技術(shù)

癌癥的進展并非一蹴而就,從基因突變到細胞團,再到更大的“組織”慢慢發(fā)展而來的。

為了提高癌癥患者的存活率,能在越早期檢測出來進行干預(yù),就有越大的可能起到更好的治療效果。因此,作為眾多腫瘤早檢早篩手段中的一種,循環(huán)腫瘤細胞檢測行業(yè)運應(yīng)而生。

而循環(huán)腫瘤細胞在血液中的含量極少,量級在血細胞中<1/10-9,因此針對循環(huán)腫瘤細胞的篩選富集與檢測產(chǎn)品各顯神通,以不同的原理實現(xiàn)早篩目的。

03檢測原理

市面上的循環(huán)腫瘤細胞檢測方案多種多樣,各有千秋。其原理大致分為抗體磁珠法、過濾法和芯片物理法。

1. 抗體磁珠法

抗體磁珠法一般又分為三類設(shè)計:

一種是正向富集法,主要依賴腫瘤細胞表面各種標志物的表達(如上皮細胞標志物EpCAM),利用偶聯(lián)在固相載體磁珠上的相應(yīng)抗體或多肽對循環(huán)腫瘤細胞進行直接捕獲; 

另一種是負向富集法,通過低滲裂解紅細胞及使用偶聯(lián)抗CD45抗體的免疫磁珠去除白細胞以達到富集非血源性腫瘤細胞的目的;

第三種是差相富集法(SE):使用特殊的非血源性細胞分離介質(zhì)去除紅細胞,利用多種抗白細胞表面標志物抗體的組合群與特殊包被的磁珠相偶聯(lián)從而最大程度去除血液中的白細胞,差相富集循環(huán)腫瘤細胞。

通過這一種篩選出來的樣本,可以通過免疫熒光或FISH方法,在熒光顯微鏡下進行樣本檢驗;

#明美光電研究級正置熒光顯微鏡MF43-N可以提供優(yōu)質(zhì)的成像,清晰的畫質(zhì)與優(yōu)良的靈敏度可以為檢測加以助力。

圖片僅示意拍攝效果,不代表樣品本身為CTCs

研究級正置熒光顯微鏡MF43-N

2. 膜/芯片過濾法

使用一定孔徑的細胞篩進行樣品過濾,可以去除體積較小的白細胞,從而分離出體積較大的循環(huán)腫瘤細胞,可以HE染色,對樣本進行形態(tài)學鑒別,也可以使用免疫組化通過熒光和明場進行判斷。

明美可以提供研究級倒置熒光顯微鏡MIX60-FL對孔板細胞進行觀察。

研究級倒置熒光顯微鏡MIX60-FL

圖片僅示意拍攝效果,不代表樣品本身為CTCs

3. 芯片物理法

根據(jù)循環(huán)腫瘤細胞的物理性質(zhì)如密度、細胞剛性、核質(zhì)比、體積等,搭載微流控芯片進行活細胞富集檢測。此種方法開放下游,可以對CTC培養(yǎng)傳代,也可以使用各種染色手段。

明美光電產(chǎn)品可以在多維度進行產(chǎn)業(yè)結(jié)合。比如在微流控芯片制造檢測端,明美高速相機MS16-H可以對微流控芯片內(nèi)部狀況進行高靈敏高幀率抓拍,幀率可達660fps。

MS16-H高速相機

微流控芯片攝影(圖片僅示意拍攝效果,不代表樣品本身為CTCs)

在CTC傳代培養(yǎng)領(lǐng)域,明美MSHOT新品活細胞掃描分析儀MCS31可以對活細胞進行無接觸式、連續(xù)拍攝監(jiān)控,可以對專領(lǐng)域細胞形態(tài)進行分析、熒光觀察、明場相差觀察、劃痕實驗、細胞凋亡等,可以在比較困難的細胞培養(yǎng)領(lǐng)域探索合適的培養(yǎng)條件,為科研助力。

活細胞掃描分析儀實拍

放在二氧化碳培養(yǎng)箱中實拍

活細胞掃描分析儀相襯與熒光拍攝(圖片僅示意拍攝效果,不代表樣品本身為CTCs)

明美光電作為顯微成像系統(tǒng)解決方案提供商,在CTC領(lǐng)域可以從上(高速攝影,研發(fā)與檢測微流控芯片)到下(FISH、免疫組化、CTC培養(yǎng)、細胞監(jiān)測)提供全鏈路的解決方案,不僅從硬件滿足多樣的需求,在軟件方面也同步跟上便利化的需要,還以其高性價比、易于操作和維護的特點,滿足了行業(yè)中企業(yè)、臨床與科研的需求。我們的方案已經(jīng)在全球10萬+用戶中得到應(yīng)用,并且獲得了良好的口碑。

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