RT-PCR
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反轉(zhuǎn)錄PCR(Reverse Reaction,RT-PCR)又稱為逆轉(zhuǎn)錄PCR。其原理是:提取組織或細(xì)胞中的總RNA,以其中的mRNA作為模板,采用Oligo(dT)或隨機(jī)引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成cDNA。
實驗項目/片段長度
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小于1000bp
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1000-2000bp
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2000-3000bp
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mRNA抽提 | 600元 | 600元 | 600元 |
反轉(zhuǎn)錄合成cDNA第一鏈 | 200元 | 400元 | 800元 |
PCR擴(kuò)增雙鏈cDNA | 300元 | 500元 | 1000元 |
純化PCR產(chǎn)物,克隆PCR產(chǎn)物到標(biāo)準(zhǔn)載體測序 | 200元 | 300元 | 500元 |
亞克隆到其他表達(dá)載體(可選) | 1000元 | 1200元 | 1500元 |
全部實驗依據(jù)實驗難度一般需要2-4周的時間 |
樣品要求:
1、 樣品可提供組織、細(xì)胞、RNA、cDNA中的一種,對于提供樣本的大致原則如下:組織樣本,盡可能提供2×2×2mm3體積或以上,新鮮組織可直接提供,不需處理;對于細(xì)胞樣本,盡可能提供3×10^6個細(xì)胞左右,加適量Trizol處理即可,確保樣品適于RNA抽提。RNA、cDNA含量根據(jù)同等細(xì)胞數(shù)量的細(xì)胞抽提和逆轉(zhuǎn)錄大致界定, 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進(jìn)行評估。
2、客戶提供盡可能詳細(xì)的背景信息;物種信息,擴(kuò)增目的基因的NCBI登錄號等。
3、由于材料的個體差異及PCR過程中會產(chǎn)生突變等原因,我們不保證獲取的基因與參考序列的堿基完全一致。
4、運(yùn)輸要求,液氮或干冰保存寄送。
提交的產(chǎn)品和資料: