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蛋白瞬時表達(TEG)
本公司為你提供蛋白瞬時表達(TEG),通過使用哺乳動物細胞TGE快速制備r-蛋白,能提供毫克(mg)級至克(g)r-蛋白。
服務(wù)類別:其他生物研發(fā)總訪問:1738
最后更新:2010-3-17半年訪問:19
參考報價:021-54887506
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  1. (TGE) 瞬時表達
    • 穩(wěn)定基因表達是將重組基因插入寄主基因組中,但鑒定及檢測重組細胞系是個耗時、昂貴的過程,因此一些客戶,尤其是轉(zhuǎn)包合同或需大規(guī)模制備最優(yōu)化細胞系的客戶選擇快速制備r-蛋白,快速蛋白制備(能提供mg(毫克)級至g(克)級)通過使用哺乳動物細胞TGE滿足這些客戶的需求。與穩(wěn)定基因表達相比,TGE主要用于短期內(nèi)制備r-蛋白,一般在10天內(nèi)即可快速轉(zhuǎn)染,無需質(zhì)粒DNA的遺傳性選擇。我們的瞬時表達使用懸浮細胞,能輕松表達毫升至100L的蛋白。適合的表達載體構(gòu)建完成四周左右,我們就能交付給客戶表達產(chǎn)物:細胞培養(yǎng)液收集物或重組蛋白。如果客戶需要,金斯瑞能將客戶的目的基因,克隆入專為TGE系統(tǒng)所設(shè)計的高效表達載體中。
 
  1. 工藝過程開發(fā)及擴大規(guī)模
    • 金斯瑞能優(yōu)化表達過程以及表達的產(chǎn)物,并能對增長率,轉(zhuǎn)種率, cell mass細胞群, 以及更改條件,促進特異化生成并測定生產(chǎn)體積等等方面進行全面的分析。金斯瑞同樣能按比例降低生產(chǎn)規(guī)模,預(yù)測細胞表達量。金斯瑞自主研發(fā)的特異性、高生產(chǎn)效率的表達系統(tǒng),是提供給客戶高通量生產(chǎn)的最佳保障。
    • 15N- 或13C-標簽蛋白表達。
 
  1. 純化
    • 蛋白表達后,我們會富集培養(yǎng)液,收集上清或細胞,進行蛋白純化。金斯瑞常用蛋白純化方式為親和柱純化,同時也提供凝膠過濾、離子交換及疏水層析等純化方法。初步純化的蛋白經(jīng)特殊蛋白酶去除純化標簽后,通過凝膠過濾進一步進行純化。
    • 15N- 或13C-標簽蛋白表達。
 
  1. 蛋白鑒定
    • 每個訂單完成后,我們的專家將確認金斯瑞交付的產(chǎn)品確實滿足客戶的需求。一般來說,金斯瑞會選取以下幾個或全部檢測方法鑒定表達的蛋白:染色后進行SDS-PAGE(十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳)或Native-PAGE(未變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)檢測,蛋白濃度測定,Western blotting檢測,吸收光譜檢測,N末端序列測定,質(zhì)譜分析,核磁共振波譜分析,以及活性檢測,親和層析,離子交換層析,凝膠過濾層析,疏水層析等方法純化蛋白。
 
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