分泌型熒光素酶試劑盒解決方案

作為報告基因，熒光蛋白（如綠色熒光蛋白（GFP）及其變體紅色熒光蛋白（RFP）和黃色熒光蛋白（YFP）或者生物熒光素酶（如螢火蟲熒光素酶（Firefly luciferase，F(xiàn)luc）海參熒光素酶（Renilla luciferase，Rluc））已成為研究基因調控、抗癌藥物活性考察、基因突變分析、生物成像、DNA雜交分析及實時監(jiān)測腫瘤發(fā)生發(fā)展情況等生物過程的潛在有效分析工具。但GFP等熒光蛋白的靈敏性相比于熒光素酶要低很多，而且GFP在細胞內容易累積，使其不適合實時監(jiān)測。現(xiàn)有的生物熒光素酶中，F(xiàn)luc發(fā)光時需要輔助因子ATP和Mg2+，Rluc雖然不依賴于ATP和Mg2+等輔助因子，但光子產量較低，另外Fluc和Rluc均不能分泌表達，監(jiān)測酶活性時需要裂解細胞，操作繁瑣且不能實現(xiàn)對實驗現(xiàn)象的連續(xù)觀察。

近年，發(fā)現(xiàn)的一種來源于海洋橈腳類動物Gaussia princeps的Gaussia 分泌型熒光素酶是體內已知最小的可自然分泌的熒光素酶。因其可分泌、易于監(jiān)測、靈敏度過、半衰期短、可進行活細胞或生物體實時監(jiān)測等特性，在研究蛋白質-蛋白質相互作用、蛋白定位、小干擾RNA（siRNA）沉默技術、腫瘤模型藥物治療評價、監(jiān)測啟動子活性、實時監(jiān)測腫瘤發(fā)生發(fā)展情況和高通量藥物篩選等中得到廣泛應用。通過報告基因載體，Gaussia可用于哺乳動物細胞表達。表達后的Gaussia為單條肽鏈的單體酶，其分子較小（185aa），且具有分泌性信號肽，因此可通過內質網分泌到細胞外。該熒光素梅催化底物腔腸素的氧化反應并且發(fā)光（480nm），該反應無需ATP參與。

與其他熒光素酶相比，使用Gaussia 作為報告基因有更多的優(yōu)勢：

1. 分泌型熒光素酶，可直接取上清檢測，無須裂解細胞；
2. 發(fā)光強度高，是其它熒光素酶的1千倍；
3. 反應無須ATP，不受ATP影響；
4. 穩(wěn)定性高，對溫度、PH值等耐受性強。

分泌型堿性磷酸酶（secreted alkaline phos-phatase，SEAP）是人胎盤堿性磷酸酶的突變體，最大特點是能由表達細胞分泌到細胞外，檢測時可在不破壞細胞的情況下，任意時間點取細胞培養(yǎng)上清液進行重復、動態(tài)的檢測，常作為熒光素酶檢測過程中信號標準化的內參。

GeneCopoeia 提供預制和定制的 GLuc-ON™ 啟動子克隆，包括單報告基因載體系統(tǒng)和雙報告基因載體系統(tǒng)。單報告基因載體系統(tǒng)以 Gluc 作為啟動子的報告基因；雙報告基因載體系統(tǒng)以 Gluc 作為啟動子報告基因，以SEAP作為信號標準化的內參，可在活細胞中對超過 20,000 種人和 18,000 種小鼠啟動子進行實時活性分析。

分泌型雙熒光素酶檢測試劑盒

Secrete-PairTM Dual Luminescence Assay Kit用于檢測雙報告系統(tǒng)中 Gluc 和SEAP的活性。Gluc 和SEAP都是分泌型蛋白，無需裂解細胞就能從培養(yǎng)基中獲得實驗樣本。

GeneCopoeia致力于為國內生命科學工作者提供一流的產品和及時周到的服務，通過豐富的基因、蛋白、抗體、分析試劑盒等產品線，加速您的研究進程。作為GeneCopoeia在中國的區(qū)域一級代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的GeneCopoeia產品以及客戶訂制化服務。

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