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近紅外熒光與激光散斑血流成像在腦血管研究的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):317 發(fā)布日期:2025-1-24  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

研究背景與技術(shù)挑戰(zhàn)
在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究中,腦血管疾病的早期診斷和治療一直是備受關(guān)注的焦點(diǎn)領(lǐng)域。傳統(tǒng)成像技術(shù)如磁共振成像(MRI)、X射線和超聲成像等,在分辨率和功能檢測(cè)方面存在一定的局限性。深圳大學(xué)團(tuán)隊(duì)的一項(xiàng)前沿研究成果,將近紅外熒光(NIR)和激光散斑血流成像(LSCI)與光學(xué)組織透明(OTC)技術(shù)相結(jié)合,為腦血管成像帶來(lái)了新的曙光。

技術(shù)創(chuàng)新與應(yīng)用
雙模式成像系統(tǒng):近紅外熒光與激光散斑血流成像聯(lián)用
該研究構(gòu)建了一個(gè)功能強(qiáng)大的雙模式成像系統(tǒng),其中808nm激光用于激發(fā)熒光成像,1064nm激光則用于激光散斑血流成像(LSCI),而690nm激光則為光動(dòng)力治療(PDT)開(kāi)辟了道路。這一系統(tǒng)通過(guò)高分辨率、高靈敏度的近紅外熒光成像以及非侵入性的激光散斑成像,實(shí)現(xiàn)了對(duì)生物結(jié)構(gòu)和功能的精準(zhǔn)觀測(cè)。為了實(shí)現(xiàn)這種雙重成像能力,研究人員精心設(shè)計(jì)了系統(tǒng)的各個(gè)組件,確保每種激光都能在其特定波長(zhǎng)下提供穩(wěn)定且有效的光源,從而最大化成像效果。

納米制劑的應(yīng)用
為了實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)的成像引導(dǎo)治療,研究人員合成了一種包含近紅外熒光染料ICG和光敏劑BPD的脂質(zhì)體納米制劑(LBI)。ICG在808nm激光的激發(fā)下發(fā)射出強(qiáng)烈的熒光信號(hào),而B(niǎo)PD則在690nm激光照射下激活,產(chǎn)生單線態(tài)氧,引發(fā)光動(dòng)力反應(yīng),從而對(duì)病變血管進(jìn)行精準(zhǔn)打擊。LBI不僅能夠作為成像探針,還能作為一種治療載體,使得研究者能夠在同一實(shí)驗(yàn)中同時(shí)完成成像和治療任務(wù),大大提高了實(shí)驗(yàn)效率和準(zhǔn)確性。

OTC活體透明技術(shù)
光學(xué)組織透明技術(shù)是本研究的關(guān)鍵基石之一。研究人員采用了一種由S1(75%乙醇和尿素飽和上清液)、S2(高濃度十二烷基苯磺酸鈉溶液)和S3(紫外線固化膠)組成的獨(dú)特方法,成功地在小鼠頭骨上打造了一個(gè)持久且高度透明的窗口,極大地提升了成像的深度和清晰度。這一技術(shù)不僅解決了生物組織對(duì)光的散射和吸收難題,還避免了開(kāi)顱手術(shù)帶來(lái)的大腦環(huán)境改變和炎癥風(fēng)險(xiǎn),有利于長(zhǎng)時(shí)間成像觀察。

典型應(yīng)用案例
成像互補(bǔ)性的有力驗(yàn)證
在成像實(shí)驗(yàn)中,熒光成像能夠捕捉到LBI的分布蹤跡,無(wú)論是在血管的主干道還是微小的分支血管中,都能清晰地顯示其存在。這使得研究人員可以根據(jù)熒光信號(hào)的強(qiáng)度和分布范圍,準(zhǔn)確地評(píng)估血管的體積和濃度情況。而激光散斑血流成像(LSCI)則敏銳地感知到顆粒運(yùn)動(dòng)所引起的散斑圖案變化,兩者互補(bǔ),提供了血管結(jié)構(gòu)和血流狀態(tài)的豐富信息。例如,在某些區(qū)域,熒光信號(hào)強(qiáng)度相似,但激光散斑血流成像(LSCI)卻揭示出了血流速度的巨大差異;而在另一些區(qū)域,雖然血管在熒光成像中清晰可見(jiàn),但由于血流速度過(guò)慢,在激光散斑血流成像(LSCI)中卻難以分辨。這種互補(bǔ)性為全面研究血管的結(jié)構(gòu)和功能提供了更為豐富和準(zhǔn)確的信息。

OTC活體透明技術(shù)成效顯著
在研究中,OTC技術(shù)成功地創(chuàng)建了一個(gè)可持續(xù)且有效的透明顱骨窗,極大地提高了成像和PDT實(shí)驗(yàn)的可視化效果。通過(guò)對(duì)比小鼠顱骨在OTC處理前后的圖像可以清晰地看到,處理后的顱骨透明度明顯提高,小鼠腦內(nèi)的血管網(wǎng)絡(luò)清晰可見(jiàn)。這為后續(xù)的成像和治療操作提供了良好的基礎(chǔ),使得研究人員能夠更準(zhǔn)確地觀察腦血管的形態(tài)和功能變化,進(jìn)一步提高了實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。

PDT光動(dòng)力治療的重要發(fā)現(xiàn)
在完成顱骨組織透明化處理后,研究人員對(duì)小鼠進(jìn)行麻醉并固定在顯微鏡臺(tái)上,首先使用明場(chǎng)照明選擇血管豐富且成像清晰的區(qū)域,然后通過(guò)尾靜脈注射LBI納米脂質(zhì)體。隨后進(jìn)行成像引導(dǎo)的靶向PDT實(shí)驗(yàn),在選定的腦區(qū)血管上,使用激光照射10分鐘。照射停止20分鐘后,獲取目標(biāo)區(qū)域的明場(chǎng)、熒光和LSCI圖像。結(jié)果顯示,熒光圖像中出現(xiàn)了明亮的熒光斑點(diǎn),這是由于受損血管出血導(dǎo)致的,同時(shí)還觀察到熒光信號(hào)普遍降低,這可能與循環(huán)中LBI濃度的下降有關(guān)。而LSCI圖像則顯示出照射區(qū)域內(nèi)毛細(xì)血管的LSC信號(hào)幾乎完全消失,這表明LBI在血管中產(chǎn)生的ROS引發(fā)了血栓形成和血管阻塞,從而導(dǎo)致照射區(qū)域的血流速度大幅降低或完全停止。

24小時(shí)后再次進(jìn)行成像觀察,明場(chǎng)成像未發(fā)現(xiàn)明顯變化,但NIR熒光成像顯示循環(huán)中的LBI近紅外熒光信號(hào)幾乎完全消失,這意味著大多數(shù)納米脂質(zhì)體已經(jīng)從血液中清除,只有極少數(shù)附著在血管壁上。而LSCI成像則顯示出先前因血管損傷而阻塞的血管出現(xiàn)了恢復(fù)跡象。這一結(jié)果得益于對(duì)激光照射劑量的精確控制,因?yàn)檫^(guò)高的照射劑量可能會(huì)導(dǎo)致不可逆的血管損傷和LBI在目標(biāo)區(qū)域的阻塞。通過(guò)比較不同時(shí)間點(diǎn)的LSCI圖像,還可以觀察到視野內(nèi)現(xiàn)有血管的血流速度有所增加,并且出現(xiàn)了新的毛細(xì)血管。

深遠(yuǎn)意義與未來(lái)展望
這項(xiàng)成果不僅能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)腦血管損傷的精準(zhǔn)誘導(dǎo)和全程有效的監(jiān)測(cè),還為癌癥和其他疾病的血管光動(dòng)力治療開(kāi)辟了一條全新的、精準(zhǔn)的成像引導(dǎo)之路。它有望推動(dòng)腦血管疾病治療的發(fā)展,提供早期精準(zhǔn)診斷和微創(chuàng)治療的可能性,大大減輕患者的痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。此外,該技術(shù)還在腫瘤治療領(lǐng)域展現(xiàn)了巨大潛力,可能催生出更加高效、安全的聯(lián)合治療方案,為癌癥患者帶來(lái)新的希望之光。

結(jié)論
深圳大學(xué)的研究引入了創(chuàng)新的經(jīng)顱腦成像和治療法,整合了近紅外熒光(NIR)和激光散斑血流成像(LSCI)等前沿成像技術(shù),為腦血管病創(chuàng)新研究和治療帶來(lái)了希望。成像引導(dǎo)的PTD光動(dòng)力療法可以精準(zhǔn)阻斷病變血管,將為靶向精確治療提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持和治療手段。

論文信息
聲明:本文僅用作學(xué)術(shù)目的。
Liu J, Xu H, Gao S, Liu L, Qu J, Ohulchanskyy TY. Combining near infrared fluorescence and laser speckle imaging with optical tissue clearing for in vivo transcranial monitoring of cerebral blood vessels damaged by photodynamic nanoformulation. Biomed Opt Express. 2024 Jan 22;15(2):924-937.

doi: 10.1364/BOE.513820. 

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